免疫細胞（immune cell）俗稱白細胞，包括淋巴細胞和各種吞噬細胞等，也特指能識別抗原、產生特異性免疫應答的淋巴細胞等。淋巴細胞是免疫系統的基本成分，在體內分布很廣泛。除淋巴細胞外，參與免疫應答的細胞還有漿細胞、粒細胞、肥大細胞、抗原呈遞細胞及單核吞噬細胞系統的細胞。

免疫細胞分離方法：

1.根據細胞屬性（如粘附）和功能不同進行細胞分離：粘附分離法、尼龍毛柱分離法、羰基鐵分離法等。

2.根據細胞的大小及比重的差異進行細胞分離：葡聚糖-泛影葡胺密度梯度離心法和Percoll 不連續密度梯度離心法等。

3.利用細胞表面標志進行細胞分離：E 花環沉淀分離技術、免疫磁珠法分離、流式細胞術分離法、補體細胞毒分離法，洗淘分離法（panning）。

其中外周血單個核細胞的分離和免疫磁珠分離細胞是最常見的免疫細胞分離方法。

外周血單個核細胞的分離

原理

外周血單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）的分離是免疫學研究中的一項基本技術。目前國內外分離 PBMC 的常用方法是葡聚糖-泛影葡胺密度梯度離心法。用此方法分離 PBMC 純度可達95％，淋巴細胞約占 90％，其中 T 淋巴細胞占 80％，B 淋巴細胞占 4～10％。下圖紅色方框內即為PBMC。

注意事項

1.實驗所用玻璃器皿應該潔凈。如果制備的單個核細胞懸液用于細胞培養時，上述操作過程都要在無菌條件下進行，所用器材、試劑都應為無菌。

2.實驗中的細胞得率與室溫及分層液比重等有關。分層液應避光 4℃保存。

3.不同屬的PBMC所需的分離液都不同，在分離人 PBMC 時，要求其比重為 1.077；分離小鼠單個核細胞時比重為 1.080；分離大鼠單個核細胞時比重為 1.084～1.087；分離馬單個核細胞時比重為 1.090。

4.往淋巴細胞分層液中加入稀釋全血時，不得將血液沖入分離液中，須保持兩層液體的清晰界面

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