細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中，把細(xì)胞處理好，根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞就像花花草草，尤其是細(xì)胞株基本每天都要觀察、打理的哦！

培養(yǎng)的細(xì)胞從哪里來？

1.細(xì)胞株

簡(jiǎn)單說就是買的或送的。

2.原代細(xì)胞

組織或血液中提取的。一般細(xì)胞株可以連續(xù)傳代，而原代細(xì)胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。

培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式有哪些？

1.貼壁生長(zhǎng)

必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。見于各種腫瘤細(xì)胞等。（你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上，細(xì)胞也不會(huì)掉下來。

2.懸浮生長(zhǎng)

于懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞等。

細(xì)胞完全培養(yǎng)基的組成有哪些？

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：80-95%

血清：5-20%

碳酸氫鈉：2.0g/L

青、鏈霉素：各200單位/毫升

細(xì)胞傳代

何為細(xì)胞傳代？

細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長(zhǎng)一定時(shí)間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿即為細(xì)胞傳代。

為什么要傳代？

簡(jiǎn)單說就是“孩子”長(zhǎng)大了，要“分家”！

細(xì)胞株在培養(yǎng)過程中數(shù)量會(huì)不斷增多，但是培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞瓶/皿的空間有限，就會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞之間接觸過于緊密，會(huì)使得細(xì)胞增殖收到抑制，所以我們必須把其中一部分細(xì)胞轉(zhuǎn)移到別的細(xì)胞瓶/皿，讓細(xì)胞有足夠的生長(zhǎng)空間。

什么時(shí)候傳代？

觀察培養(yǎng)基是否正常，細(xì)胞狀態(tài)如何，細(xì)胞密度如何，決定是否傳代。如培養(yǎng)基變黃，細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層等情況。

傳代方法有哪些？

1.懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

1)離心法傳代：離心1000轉(zhuǎn)/分去上清，沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。

2)直接傳代法：懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁上，將上清培養(yǎng)液去除1/2~2/3，然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。

2.半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

此類細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，但是貼壁不牢，可用直接吹打使細(xì)胞從瓶壁上脫落下來，進(jìn)行傳代。

3.貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

采用胰酶消化法傳代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。

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