1.根據細胞屬性(如粘附)和功能不同進行細胞分離:粘附分離法、尼龍毛柱分離法、羰基鐵分離法等。
2.根據細胞的大小及比重的差異進行細胞分離:葡聚糖-泛影葡胺密度梯度離心法和Percoll 不連續密度梯度離心法等。
3.利用細胞表面標志進行細胞分離:E 花環沉淀分離技術、免疫磁珠法分離、流式細胞術分離法、補體細胞毒分離法,洗淘分離法(panning)。
其中外周血單個核細胞的分離和免疫磁珠分離細胞是最常見的免疫細胞分離方法。
外周血單個核細胞的分離
原理
外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的分離是免疫學研究中的一項基本技術。目前國內外分離 PBMC 的常用方法是葡聚糖-泛影葡胺密度梯度離心法。用此方法分離 PBMC 純度可達95%,淋巴細胞約占 90%,其中 T 淋巴細胞占 80%,B 淋巴細胞占 4~10%。下圖紅色方框內即為PBMC。
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