1. 空氣空白\水空白：一般是用于儀器調零的,所有孔數值減掉該孔數值。

2.底物空白：一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數偏高，同樣所有孔數值減掉該孔數值(只加底物和終止液)

3. 酶空白：一般在2步法實驗中使用，主要是看酶是否和板有非特異性結合的，一般不做這個。

ELISA試劑盒空白孔一般設一個，這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性標準品最好是設2個復孔。

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