“邊緣效應”是指在利用96孔板進(jìn)行細胞培養時(shí)，細胞在孔板中的位置會(huì )影響細胞的生長(cháng)狀態(tài)，尤其是處在周邊及四個(gè)角的孔中細胞通常會(huì )表現出分布不均的現象。
出現“邊緣效應”的原因主要有兩方面：
1. 溫度效應：經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因?？装宓木郾揭蚁┍旧頌椴涣紵釋w，在實(shí)驗室的常規ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。
2. 蒸發(fā)效應：雖然通常細胞培養箱中都會(huì )放置一盤(pán)雙蒸水以維持培養箱中的濕度，但仍難達到多孔板中的濕度，特別是在培養箱經(jīng)常開(kāi)關(guān)的情況更是如此。由于位置效應，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現象就更為嚴重。這樣就容易造成四周培養基的體積會(huì )明顯少于中間孔，而四個(gè)角落的孔尤為嚴重。
所以我們在鋪96孔板的時(shí)候，一般外圍這一圈是加PBS，中間的60個(gè)孔才加細胞。
細節決定成敗，細胞鋪板看似簡(jiǎn)單，實(shí)則需要耐心、細致的操作。當然，熟能生巧，相信你多鋪幾塊板，自己也能總結出自己的經(jīng)驗。
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